Test nhanh phát hiện kháng thể IgM kháng Enterovirus 71 Healgen

Khay Xét nghiệm Nhanh Kháng thể IgM kháng EV71 (Máu toàn phần/Huyết thanh/Huyết tương) là công cụ xét nghiệm miễn dịch sắc ký nhanh giữa hai lớp kháng thể nhằm phát hiện định tính kháng thể lớp IgM kháng lại virus Enterovirus 71 (EV71) trong máu toàn phần, huyết thanh hoặc huyết tương ở người. Bộ công cụ được thiết kế để xét nghiệm sàng lọc và hỗ trợ chẩn đoán nhiễm EV71. Bất kỳ mẫu thử nào phản ứng với Khay Xét nghiệm Nhanh Kháng thể IgM kháng EV71 (Máu toàn phần/Huyết thanh/Huyết tương) phải được xác nhận bằng (các) phương pháp xét nghiệm thay thế và kết quả lâm sàng.

Khay Xét nghiệm Nhanh Kháng thể IgM kháng EV71 (Máu toàn phần/Huyết thanh/Huyết tương) dựa trên nguyên lý ngưng kết huyết thanh trên màng và sử dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch. Miếng gạc mẫu được phủ kháng nguyên EV71. Khi mẫu thử chảy qua cụm gạc mẫu của thiết bị, phức hợp kháng nguyên EV71 phản ứng với các kháng thể đặc hiệu EV71 có trong mẫu thử.

Khi phức hợp này di chuyển trên cụm gạc được tẩm kháng thể của chuột kháng lại EV71 liên kết với tinh chất vàng, tinh chất vàng EV71 phản ứng với phức hợp sau đó dịch chuyển trên màng theo cơ chế mao dẫn. Phức hợp này dịch chuyển xa hơn trên màng đến vùng thử (T), tại đâyphức hợp được giữ cố định bởi kháng thể kháng IgM ở người được phủ trên màng, dẫn đến hình thành vạch màu hồng/tím. Nếu không xuất hiện vạch này trong vùng thử (T) thì kết quả là âm tính. Bộ xét nghiệm có đối chứng cục bộ (vạch C) được phủ kháng thể IgG của dê kháng IgG chuột, sẽ hiển thị vạch màu đỏ tía bất kể vạch màu có hình thành trên vùng T hay không. Nếu không có vạch đối chứng, kết quả xét nghiệm sẽ vô hiệu và mẫu phải được xét nghiệm lại bằng thiết bị khác.

LẤY MẪU BỆNH PHẨM 

- Có thể sử dụng máu toàn phần chống kết tập cũng như huyết thanh/huyết tương. Mẫu máu toàn phần hoặc huyết tương chứa chất chống đông máu ngoài EDTA, Oxalate hoặc Heparin có thể cho kết quả không chính xác.

- Huyết thanh/huyết tương có thể được bảo quản ở nhiệt độ 2-8oC trong tối đa 3 ngày nếu phải trì hoãn xét nghiệm. Để bảo quản lâu dài, đông lạnh mẫu ở -20oC. Máu toàn phần phải được sử dụng ngay và không nên trữ đông.

- Nên tránh đông lạnh và rã đông mẫu huyết thanh/huyết tương nhiều lần. Cho phép tối đa 2 chu kỳ đông lạnh/rã đông.

- Không sử dụng mẫu bị tan máu, vón cục, bị ô nhiễm, nhớt/đục.

- Mẫu chứa chất kết tủa hoặc chất dạng hạt phải được ly tâm và chỉ sử dụng chất nổi trong suốt phía trên để xét nghiệm.

- Không làm bất hoạt mẫu bằng nhiệt trước khi sử dụng

QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM 

- Để khay xét nghiệm, mẫu thử, chất đệm và/hoặc đối chứng ổn định ở nhiệt độ phòng (15-30°C) trước khi xét nghiệm.

- Pha loãng mẫu: Dùng ống pipet lấy 10 μL mẫu huyết thanh/huyết tương hoặc 20μL mẫu máu toàn phần cho vào ống pha loãng mẫu và trộn đều.

- Khi đã sẵn sàng xét nghiệm, mở túi theo đường rãnh và lấy thiết bị ra. Đặt thiết bị xét nghiệm lên bề mặt phẳng, sạch sẽ.

- Ghi nhãn thiết bị bằng mã số ID của mẫu.

- Hút đầy mẫu vào ống nhỏ giọt pipet. Giữ ống nhỏ thẳng đứng và nhỏ 2-3 giọt (khoảng 60-90μL) mẫu đã pha loãng vào giếng mẫu sao cho không có bọt khí, sau đó bắt đầu hẹn giờ.

- Đợi (các) vạch màu đỏ xuất hiện. Kết quả sẽ được đọc trong vòng 15 phút. Không đọc kết quả sau 15 phút.

DIỄN GIẢI KẾT QUẢ 

Dương tính: Nếu cả hai vạch C và T đều xuất hiện, xét nghiệm cho thấy có kháng thể IgM kháng EV71 trong mẫu. Kết quả là dương tính.

Âm tính: Nếu chỉ xuất hiện vạch C, xét nghiệm cho thấy không có kháng thể IgM kháng EV71 nào trong mẫu. Kết quả là âm tính.

Vô hiệu: Vạch đối chứng không xuất hiện. Khối lượng mẫu không đủ hoặc kỹ thuật xét nghiệm không chính xác là những lý do thường gặp nhất dẫn đến lỗi này. Hãy xem lại quy trình và thử lại bằng bộ xét nghiệm mới. Nếu tình trạng vẫn tiếp diễn, hãy ngừng sử dụng bộ xét nghiệm ngay lập tức và liên hệ với nhà phân phối địa phương.

ĐỐI CHỨNG 

- Bộ xét nghiệm có bao gồm đối chứng thủ thuật cục bộ. Một vạch màu xuất hiện trong vùng vạch đối chứng (C) chính là đối chứng dương cục bộ. Vạch này xác nhận rằng lượng mẫu đủ, độ thấm màng thích hợp và kỹ thuật thực hiện đúng.

- Các tiêu chuẩn đối chứng không được cung cấp kèm theo bộ sản phẩm; tuy nhiên, chúng tôi khuyến nghị nên kiểm tra các đối chứng dương và âm – đây là một thông lệ thực hành tốt trong phòng thí nghiệm để xác nhận quy trình xét nghiệm và kiểm định công năng xét nghiệm phù hợp của bộ sản phẩm.

HẠN CHẾ 

- Phải tuân thủ nghiêm ngặt quy trình xét nghiệm, các biện pháp phòng ngừa và cách diễn giải kết quả xét nghiệm trong quá trình xét nghiệm. Nếu không, thủ thuật xét nghiệm có thể cho kết quả không chính xác.

- Xét nghiệm này phát hiện sự tồn tại của kháng thể IgM kháng lại EV71 trong mẫu bệnh phẩm và không nên sử dụng làm tiêu chí duy nhất để chẩn đoán nhiễm EV71.

- Kết quả âm tính chưa chắc loại trừ khả năng phơi nhiễm hoặc nhiễm EV71, chẳng hạn khi đối tượng vừa mới bị lây nhiễm do tiếp xúc EV71gần đây (chuyển đổi kết quả huyết thanh). Đối với các mẫu cho kết quả dương tính, không thể căn cứ vào sắc độ của vạch để đánh giá mức kháng thể IgM kháng lại EV71. Nếu nhận được kết quả vô hiệu, nên xét nghiệm lại.

- Xét nghiệm có thể cho kết quả âm tính nếu số lượng kháng thể IgM kháng lại EV71 có trong mẫu thấp hơn ngưỡng phát hiện của xét nghiệm hoặc các kháng thể được phát hiện nhưng không xuất hiện trong giai đoạn lấy mẫu.

- Nếu sau khi xét nghiệm lại các mẫu phản ứng ban đầu, kết quả là âm tính thì nên coi các mẫu này là không cần xét lại (dương tính giả) và hiểu là âm tính. Giống như nhiều xét nghiệm chẩn đoán nhanh độ nhạy cao, kết quả dương tính giả có thể xảy ra do một số lý do, hầu hết đều liên quan đến, chẳng hạn, chất lượng của mẫu và nguy cơ bộ xét nghiệm tiếp xúc với môi trường ẩm.

- Sản phẩm chỉ phù hợp để xét nghiệm từng mẫu riêng lẻ trong ống nghiệm. Không sử dụng để xét nghiệm các mẫu tử thi, nước bọt, nước tiểu hoặc các chất dịch cơ thể khác hoặc máu gộp (trộn).

- Giống như với tất cả các xét nghiệm chẩn đoán, không nên đưa ra kết luận chẩn đoán lâm sàng chỉ căn cứ vào kết quả của một xét nghiệm duy nhất, mà phải dựa vào tất cả các kết quả lâm sàng và xét nghiệm đã được đánh giá.